1Laboratory animal research and production department. Razi vaccine and serum research instittute.karaj.Iran.
2Academic Faculty of Veterinary Medicine, Research Center for Ticks and Tick-borne Diseases (RCTTD), University of Tehran, Iran staff
3Parasitic Vaccine Research and Production Department, Razi Vaccine and Serum Research institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
4Department of Parasite Vaccine Research and Production, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agriculture Research, Education, and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
53. Department of Parasitology, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agriculture Research, Education, and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
6Department of parasite vaccine research and production,Razi vaccine and serum research institute, Karaj, Iran
چکیده
Abstract Background: Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan in the phylum Apicomplexa. In addition to humans, toxoplasmosis can also cause serious diseases in livestock, leading to significant economic losses. The Toxoplasma gondii parasite is transmitted through the feces of its primary host, the Felidae family. The use of molecular methods with high sensitivity has made it possible to detect and study microorganisms. In this study the cytochrome b and dense granule 20 (Gra20) genes were utilized for studying Toxoplasma gondii parasites. Materials and methods: After collecting 29 animal samples of Toxoplasma gondii, the PCR method was applied to evaluate the presence of Gra20 and cytochrome b genes. The sequence of 11 samples was acceptable and submitted in the NCBI database. Mega X software was utilized to create the phylogenetic tree. In addition, the genetic diversity was studied using the RFLP-PCR assay for Gra6 gene. Results: Assessment of the bands obtained from PCR showed that the bands related to cytochrome b are found in all species of the Sarcocystidae family, but the bands related to the Gra20 gene are specific to Toxoplasma gondii. In the phylogenic tree, there was a closer relationship between Iranian isolates of Toxoplasma gondii and French strain of Toxoplasma gondii. Type I was determined as the genetic type of protozoan Toxoplasma gondii isolated from Iran. Conclusion: Based on the results, the cytochrome b gene was considered as a general gene for recognizing different species of the Sarcocystidae family, however divergence was seen in the Gra20 gene, which is considered a particular gene for Toxoplasma gondii.
مطالعه فیلوژنتیکی تک یاخته توکسوپلاسما گوندی با استفاده از ژن های سیتوکروم بی و Gra20
چکیده [English]
چکیده سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی یک تک یاخته درون سلولی اجباری در شاخه Apicomplexa است. علاوه بر انسان، توکسوپلاسموز می تواند باعث بیماری های جدی در دام ها شود که منجر به خسارات اقتصادی قابل توجهی می شود. انگل توکسوپلاسما گوندی از طریق مدفوع میزبان اصلی خود یعنی خانواده Felidae منتقل می شود. استفاده از روش های مولکولی با حساسیت بالا امکان شناسایی و مطالعه میکروارگانیسم ها را فراهم کرده است. در این مطالعه از ژن های سیتوکروم b و گرانول متراکم 20 (Gra20) برای بررسی انگل های توکسوپلاسما گوندی استفاده شد. مواد و روشها: پس از جمعآوری 29 نمونه حیوانی توکسوپلاسما گوندی، از روش PCR برای بررسی حضور ژنهای Gra20 و سیتوکروم b استفاده شد. توالی 11 نمونه قابل قبول بود و در پایگاه داده NCBI ارسال شد. برای ایجاد درخت فیلوژنتیک از نرم افزار Mega X استفاده شد. علاوه بر این، تنوع ژنتیکی با استفاده از روش RFLP-PCR برای ژن Gra6 مورد مطالعه قرار گرفت. یافتهها: ارزیابی باندهای بهدستآمده از PCR نشان داد که باندهای مربوط به سیتوکروم b در همه گونههای خانواده Sarcocystidae وجود دارد، اما باندهای مربوط به ژن Gra20 مختص توکسوپلاسما گوندی است. در درخت فیلوژنیک، بین جدایه های ایرانی توکسوپلاسما گوندی و سویه فرانسوی توکسوپلاسما گوندی رابطه نزدیک تری وجود داشت. تیپ I به عنوان تیپ ژنتیکی تک یاخته Toxoplasma gondii جدا شده از ایران تعیین شد. نتیجهگیری: بر اساس نتایج، ژن سیتوکروم b بهعنوان یک ژن عمومی برای شناسایی گونههای مختلف خانواده Sarcocystidae در نظر گرفته شد، اما در ژن Gra20 که یک ژن خاص برای توکسوپلاسما گوندی محسوب میشود، واگرایی مشاهده شد.