karimi, Nafiseh, Tabatabaei, Mohammad, Yektaseresht, Azadeh, Hemati, Zahra. (1402). Evaluation of Indigenous latex agglutination assay based on recombinant pasteurella lipoprotein E (rPlpE) as antigen for detection of anti Mannheimia haemolytica - IgG Antibodies. سامانه مدیریت نشریات علمی, (), -. doi: 10.22092/ari.2024.364038.2934
Nafiseh karimi; Mohammad Tabatabaei; Azadeh Yektaseresht; Zahra Hemati. "Evaluation of Indigenous latex agglutination assay based on recombinant pasteurella lipoprotein E (rPlpE) as antigen for detection of anti Mannheimia haemolytica - IgG Antibodies". سامانه مدیریت نشریات علمی, , , 1402, -. doi: 10.22092/ari.2024.364038.2934
karimi, Nafiseh, Tabatabaei, Mohammad, Yektaseresht, Azadeh, Hemati, Zahra. (1402). 'Evaluation of Indigenous latex agglutination assay based on recombinant pasteurella lipoprotein E (rPlpE) as antigen for detection of anti Mannheimia haemolytica - IgG Antibodies', سامانه مدیریت نشریات علمی, (), pp. -. doi: 10.22092/ari.2024.364038.2934
karimi, Nafiseh, Tabatabaei, Mohammad, Yektaseresht, Azadeh, Hemati, Zahra. Evaluation of Indigenous latex agglutination assay based on recombinant pasteurella lipoprotein E (rPlpE) as antigen for detection of anti Mannheimia haemolytica - IgG Antibodies. سامانه مدیریت نشریات علمی, 1402; (): -. doi: 10.22092/ari.2024.364038.2934
Evaluation of Indigenous latex agglutination assay based on recombinant pasteurella lipoprotein E (rPlpE) as antigen for detection of anti Mannheimia haemolytica - IgG Antibodies
1Department of Pathobiology, School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran
2Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Shahrekord, Shahrekord, Iran
چکیده
Mannheimia haemolytica (M. haemolytica) is an organism causing pneumonia in ruminants. M. haemolytica leads to severe economic losses to the global livestock industry. Different diagnostic methods have been developed such as bacterial culture, bacterial DNA detection and serological assays. Diagnosis of M. haemolytica is based on the bacteriological methods such as isolation of the microorganisms from clinical specimens. Available methods are time-consuming and not easy to perform. Serological tests based on recombinant protein may provide higher sensitivity and specificity than culture tests. There is a need for new diagnostic methods for detection of M.haemolytica specific antibodies. Therefore, it is important to develop an accurate methods for rapid detection of M. haemolytica. In this study, latex agglutination test (LAT) was developed based on recombinant outer membrane pasteurella lipoprotein E (rPlpE) for detecting specific antibodies against M. haemolytica. Recombinant PlpE was constructed using pET26 (b) expression vector in Escherichia coli. Expressed recombinant PlpE was purified and coated with latex particles for a latex agglutination test. The recombinant PlpE was able to detect anti-M. haemolytica IgG in positive sera but did not show any immunoreaction with Pasteurella multocida and negative samples. These results suggest that the rPlpE can be used to detect the specific anti Mannheimia haemolytica - IgG Antibodies. Because the recombinant proteins can be produced efficiently and are cost-effective, their use in diagnostic kits such as LATs as reagents can reduce the cost of them. This rapid and specific anti M. haemolytica antibodies detection method using recombinant proteins can save cost and be widely applied for efficient and practical detection of. M. haemolytica.
Keywords: Antibody, Latex agglutination test, Mannheimia haemolytica, PlpE, Recombinant protein
ارزیابی روش آگلوتیناسیون لاتکس بومی مبتنی برلیپوپروتئین E پاستورلا نوترکیب (rPlpE) به عنوان آنتی ژن برای تشخیص آنتی بادی ضد Mannheimia Heamolytica - IgG
انتی بادی ها
چکیده [English]
Mannheimia haemolytica (M. haemolytica) یک پاتوژن اصلی است که باعث پنومونی در نشخوارکنندگان می شود. M. haemolytica منجر به خسارات اقتصادی شدیدی به صنعت جهانی دام می شود. بنابراین، توسعه یک روش دقیق برای تشخیص سریع M. haemolytica برای کنترل شیوع بیماری M. haemolytica مورد نیاز است. در این مطالعه، ما اثربخشی غشای خارجی نوترکیب پاستورلا لیپوپروتئین E (rPlpE) را در تست آگلوتیناسیون لاتکس (LAT) برای تشخیص آنتیبادیهای اختصاصی M. heamolytica ارزیابی کردیم. ما یک PlpE نوترکیب (rPlpE) با استفاده از وکتور بیان pET26 (b) در اشریشیا کلی با بازده و خلوص بالا تولید کردیم. rPlpE با ذرات لاتکس برای آزمایش آگلوتیناسیون لاتکس پوشانده شد. این PlpE نوترکیب قادر به تشخیص آنتی M بود. همولیتیکا IgG در سرم های مثبت اما هیچ واکنش ایمنی با پاستورلا مولتوسیدا و نمونه های منفی نشان نداد. این نتایج نشان میدهد که rPlpE تولید شده در اینجا میتواند برای تشخیص خاص آنتیبادیهای M. haemolytica با طیف گستردهای از کاربردها در تشخیص بالینی استفاده شود. از آنجایی که تولید پروتئین های نوترکیب نسبتا راحت تر و مقرون به صرفه تر است، استفاده از این پروتئین ها در LAT می تواند هزینه نهایی کیت های تشخیصی را کاهش دهد.) یک پاتوژن اصلی است که باعث پنومونی در نشخوارکنندگان می شود. M. haemolytica منجر به خسارات اقتصادی شدیدی به صنعت جهانی دام می شود. بنابراین، توسعه یک روش دقیق برای تشخیص سریع M. haemolytica برای کنترل شیوع بیماری M. haemolytica مورد نیاز است. در این مطالعه، ما اثربخشی غشای خارجی نوترکیب پاستورلا لیپوپروتئین E (rPlpE) را در تست آگلوتیناسیون لاتکس (LAT) برای تشخیص آنتیبادیهای اختصاصی M. heamolytica ارزیابی کردیم. ما یک PlpE نوترکیب (rPlpE) با استفاده از وکتور بیان pET26 (b) در اشریشیا کلی با بازده و خلوص بالا تولید کردیم. rPlpE با ذرات لاتکس برای آزمایش آگلوتیناسیون لاتکس پوشانده شد. این PlpE نوترکیب قادر به تشخیص آنتی M بود. همولیتیکا IgG در سرم های مثبت اما هیچ واکنش ایمنی با پاستورلا مولتوسیدا و نمونه های منفی نشان نداد. این نتایج نشان میدهد که rPlpE تولید شده در اینجا میتواند برای تشخیص خاص آنتیبادیهای M. haemolytica با طیف گستردهای از کاربردها در تشخیص بالینی استفاده شود. از آنجایی که تولید پروتئین های نوترکیب نسبتا راحت تر و مقرون به صرفه تر است، استفاده از این پروتئین ها در LAT می تواند هزینه نهایی کیت های تشخیصی را کاهش دهد.