1استادیار بخش تحقیقات علوم دامی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان کردستان، سنندج، ایران
2بخش تحقیقات زنبورعسل، موسسه تحقیقات علوم دامی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران
3پژوهشگر بخش تحقیقات زنبورعسل موسسه تحقیقات علوم دامی کشور/ سازمان آموزش تحقیقات و ترویج کشاورزی
چکیده
برخلاف بسیاری از موجودات، حشرات منجمله زنبورعسل دارای کوتیکول سخت و سفت بوده و همین موضوع استخراج DNA از آنها را با مشکل مواجه کرده است. برای استخراج DNA از زنبورعسل (Apis mellifera) و سایر گونههای جنس Apis اکثراً از دستورالعملهای عمومی که بیشتر برای استخراج DNA از بافتهای گیاهی و خون طراحی و بهینه شده، استفاده میشود. DNA استخراج شده زنبورعسل با استفاده از دستورالعملهای بهینه شده برای بافتهای گیاهی و خون اکثراً دارای کیفیت خیلی پایینی بوده و آلودگی پروتئینی و RNA بالایی دارد که مشکلات زیادی را حین تکثیر در واکنش زنجیرهای پلیمراز و مراحل بعدی آنالیزها درست میکند. از آنجاییکه نقطه شروع و اساس کار تمام تحقیقات ژنتیک مولکولی و مهندسی ژنتیک، جدا سازی DNA با کیفیت عالی است و از طرف دیگر، با توجه به نتایج متفاوت دستورالعملهای استفاده شده جهت استخراج DNA زنبورعسل در آزمایشگاههای خارج و داخل کشور و اهمیت و ضرورت تحقیقات مولکولی روی زنبورعسل ایرانی، در ادامه مطلب نحوی نمونهبرداری، تعداد نمونه زنبورعسل مورد نیاز، شرایط نگهداری نمونهها، مراحل دستورالعمل بهینه شده استخراج DNA از زنبورعسل ایرانی و روش تعیین کیفیت و کیمت آن ارائه خواهد شد.
1Animal Science Department Research, Kurdistan Agricultural and Natural Resources Research and Education Center, AREEO, Sanandaj, Iran
2Sanandaj, Iran
2. Honey Bee Research Department, Animal Science Research of Iran, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
3Animal Science Research Institute of Iran, Agricultural Research Education and Extension Organization, Karaj, Iran
چکیده [English]
Unlike many organisms, insects, especially honey bees, have hard cuticles, which makes it difficult to extract DNA from them. The optimized general protocols for extracting DNA from plant tissues and blood are mostly used for extracting DNA from honey bees (Apis mellifera) and other species of the Apis genus. In these conditions, the extracted DNA is mostly of very low quality and has high protein and RNA contamination, which causes many problems during amplification in the polymerase chain reaction and subsequent stages of analysis. Considering the importance of DNA quality, the different results of the protocols used to extract DNA from honey bees in different laboratories, and the necessity of molecular research on Iranian honey bees, we will present the sampling method, the number of honey bee samples required, the storage conditions of the samples, Steps of the optimized protocol for extracting DNA from Iranian honey bees, and the methods for the quantity and quality of the extracted DNA in this article.
کلیدواژهها [English]
Honey bee, DNA extraction, Optimized protocol, Molecular genetics