اخبار و اعلانات

 آمار

تعداد نشریات284
تعداد نشریات سازمان82
تعداد شماره‌ها3,083
تعداد مقالات34,394
تعداد مشاهده مقاله48,223,644
تعداد دریافت فایل اصل مقاله78,992,624
Yari, A, Bamdad, T, Hosseini, S. Y. (1402). Comparison of Three Different Methods of Transfection for the Production of Recombinant Adenovirus Expressing Human Carcinoembryonic Antigen Gene. سامانه مدیریت نشریات علمی, 78(3), 1057-1064. doi: 10.22092/ari.2021.354824.1651
A Yari; T Bamdad; S. Y Hosseini. "Comparison of Three Different Methods of Transfection for the Production of Recombinant Adenovirus Expressing Human Carcinoembryonic Antigen Gene". سامانه مدیریت نشریات علمی, 78, 3, 1402, 1057-1064. doi: 10.22092/ari.2021.354824.1651
Yari, A, Bamdad, T, Hosseini, S. Y. (1402). 'Comparison of Three Different Methods of Transfection for the Production of Recombinant Adenovirus Expressing Human Carcinoembryonic Antigen Gene', سامانه مدیریت نشریات علمی, 78(3), pp. 1057-1064. doi: 10.22092/ari.2021.354824.1651
Yari, A, Bamdad, T, Hosseini, S. Y. Comparison of Three Different Methods of Transfection for the Production of Recombinant Adenovirus Expressing Human Carcinoembryonic Antigen Gene. سامانه مدیریت نشریات علمی, 1402; 78(3): 1057-1064. doi: 10.22092/ari.2021.354824.1651

Comparison of Three Different Methods of Transfection for the Production of Recombinant Adenovirus Expressing Human Carcinoembryonic Antigen Gene

Archives of Razi Institute
مقاله 35، دوره 78، شماره 3، مرداد و شهریور 2023، صفحه 1057-1064    اصل مقاله (507.98 K)
نوع مقاله: Original Articles
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2021.354824.1651
نویسندگان
A Yari1؛ T Bamdad* 1؛ S. Y Hosseini2
1Medical Virology Department, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
2Bacteriology and Virology Department, Medical Sciences University, Shiraz, Iran
چکیده
Adenoviral vectors (AdVs) are widely used as a gene delivery vehicle and vaccine design due to their genetic stability, transfer capacity of large genes, production at high titers, and remarkable efficacy of transduction. One of the most important applications of AdVs is in cancer immunotherapy. Tumor-associated antigens are overexpressed in cancer cells; however, they cannot induce immune responses sufficiently. Therefore, the immune system must be stimulated against these antigens to kill the cancer cells. This study described the construction steps of a recombinant AdV expressing human carcinoembryonic antigen (CEA) gene. Furthermore, in order to achieve a high titer of the virus, an efficient transfection was required. Three various transfection reagents were compared to achieve the best method of transfection. Carcinoembryonic antigen was cloned into the pAdV and transfected into the A293 cells using three different reagents, including polyethylenimine (PEI), calcium phosphate, and DMRIE-C. The PEI had the highest transfection efficiency, which was selected for the transfection of the recombinant plasmid. It has low toxicity for cells and is suitable for large-scale transfection. The virus produced in this study can be applied as a vaccine in cancer immunotherapy for stimulating the immune system against CEA-expressing tumors.
کلیدواژه‌ها
Adenoviral vector؛ Calcium phosphate؛ DMRIE-C؛ Polyethylenimine؛ Vaccine
عنوان مقاله [English]
مقایسه سه متد مختلف ترنسفکشن جهت تولید آدنوویروس نوترکیب بیان کننده ژن انسانی آنتی ژن کارسینوامبریونیک
چکیده [English]
وکتورهای آدنوویروسی به دلیل پایداربودن از لحاظ ژنتیکی، توانایی انتقال ژنهای بزرگ، تولید در تیترهای بالا، ترنسفکشن با کارامدی قابل توجه و غیره به عنوان وسیله ای جهت انتقال ژن و طراحی واکسن مورد استفاده قرار می گیرند. یکی از کاربردهای مهم آنها درمان سرطان به روش ایمنوتراپی است. آنتی ژن های مرتبط با تومور در سلول های سرطانی بیش از حد بیان می شوند اما نمی توانند پاسخ های ایمنی را به اندازه کافی القا نمایند، بنابراین جهت نابودی و از بین بردن سلولهای سرطانی سیستم ایمنی باید علیه این آنتی ژنها تحریک و فعال گردد. در این مطالعه ما مراحل ساخت وکتور آدنوویروسی بیان کننده ژن انسانی آنتی ژن کارسینو امبریونیک را شرح داده ایم. علاوه بر این، جهت دستیابی به تیتر بالایی از ویروس، ترنسفکشن پلاسمید واجد ژن باید بطور کارامدی انجام شود. بنابراین، سه معرف مختلف ترانسفکشن نیز با یکدیگر مقایسه گردید. آنتی ژن کارسینو امبریونیک در وکتور pAdenoVator کلون شد و با استفاده از سه معرف مختلف از جمله پلی اتیلن ایمین (PEI) ، کلسیم فسفات و DMRIE-C به سلولهای 293 A ترانسفکت گردید. پس از تولید وکتور نوترکیب آدنوویروسی، این وکتور به سلول 293 A ترنسداکت و سپس تیتر آن زیاد گردید. پلی اتیلن ایمین بالاترین کارایی ترنسفکشن را داشت که جهت ترنسفکشن پلاسمید نوترکیب انتخاب گردید. پلی اتیلن ایمین، سمیت کمی برای سلول ها دارد و جهت ترنسفکشن در مقیاس بزرگ مناسب می باشد. ویروس تولید شده در این مطالعه می تواند به عنوان واکسن در ایمنوتراپی سرطان جهت تحریک سیستم ایمنی علیه تومورهای بیان کننده آنتی ژن کارسینوامبریونیک استفاده گردد.
کلیدواژه‌ها [English]
وکتور آدنوویروسی, کلسیم فسفات, دی ام ری سی, پلی اتیلن ایمین, واکسن
سایر فایل های مرتبط با مقاله
مراجع
  1. He Y, Zhang J, Donahue C, Falo LD, Jr. Skin-derived dendritic cells induce potent CD8(+) T cell immunity in recombinant lentivector-mediated genetic immunization. Immunity. 2006;24(5):643-56.
  2. Aldhamen YA, Seregin SS, Kousa YA, Rastall DP, Appledorn DM, Godbehere S, et al. Improved cytotoxic T-lymphocyte immune responses to a tumor antigen by vaccines co-expressing the SLAM-associated adaptor EAT-2. Cancer Gene Ther. 2013;20(10):564-75.
  3. Hensel JA, Khattar V, Ashton R, Ponnazhagan S. Recombinant AAV-CEA Tumor Vaccine in Combination with an Immune Adjuvant Breaks Tolerance and Provides Protective Immunity. Mol Ther Oncolytics. 2019;12:41-8.
  4. Quiroga D, Aldhamen YA, Appledorn DM, Godbehere S, Amalfitano A. Strengthened tumor antigen immune recognition by inclusion of a recombinant Eimeria antigen in therapeutic cancer vaccination. Cancer Immunol Immunother. 2015;64(4):479-91.
  5. D'Alise AM, Leoni G, Cotugno G, Troise F, Langone F, Fichera I, et al. Adenoviral vaccine targeting multiple neoantigens as strategy to eradicate large tumors combined with checkpoint blockade. Nat Commun. 2019;10(1):2688.
  6. Lee CS, Bishop ES, Zhang R, Yu X, Farina EM, Yan S, et al. Adenovirus-Mediated Gene Delivery: Potential Applications for Gene and Cell-Based Therapies in the New Era of Personalized Medicine. Genes Dis. 2017;4(2):43-63.
  7. Tian X, Fan Y, Wang C, Liu Z, Liu W, Xu Y, et al. Seroprevalence of Neutralizing Antibodies against Six Human Adenovirus Types Indicates the Low Level of Herd Immunity in Young Children from Guangzhou, China. Virol Sin. 2021;36(3):373-81.
  8. Wold WS, Toth K. Adenovirus vectors for gene therapy, vaccination and cancer gene therapy. Curr Gene Ther. 2013;13(6):421-33.
  9. Loustalot F, Kremer EJ, Salinas S. The Intracellular Domain of the Coxsackievirus and Adenovirus Receptor Differentially Influences Adenovirus Entry. J Virol. 2015;89(18):9417-26.
  10. Larocca C, Schlom J. Viral vector-based therapeutic cancer vaccines. Cancer J. 2011;17(5):359-71.
  1. Luo J, Deng ZL, Luo X, Tang N, Song WX, Chen J, et al. A protocol for rapid generation of recombinant adenoviruses using the AdEasy system. Nat Protoc. 2007;2(5):1236-47.
  2. Ricobaraza A, Gonzalez-Aparicio M, Mora-Jimenez L, Lumbreras S, Hernandez-Alcoceba R. High-Capacity Adenoviral Vectors: Expanding the Scope of Gene Therapy. Int J Mol Sci. 2020;21(10).
  3. Sato-Dahlman M, LaRocca CJ, Yanagiba C, Yamamoto M. Adenovirus and Immunotherapy: Advancing Cancer Treatment by Combination. Cancers (Basel). 2020;12(5).
  4. Crosby EJ, Hobeika AC, Niedzwiecki D, Rushing C, Hsu D, Berglund P, et al. Long-term survival of patients with stage III colon cancer treated with VRP-CEA(6D), an alphavirus vector that increases the CD8+ effector memory T cell to Treg ratio. J Immunother Cancer. 2020;8(2).
  5. Zhang Y, Rajput A, Jin N, Wang J. Mechanisms of Immunosuppression in Colorectal Cancer. Cancers (Basel). 2020;12(12).
  6. Gupta A, Rosato AJ, Cui F. Vaccine candidate designed against carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecules using immunoinformatics tools. J Biomol Struct Dyn. 2021;39(16):6084-98.
  7. Ramos-Murillo AI, Rodriguez E, Beltran K, Ricaurte C, Camacho B, Salguero G, et al. Efficient Non-Viral Gene Modification of Mesenchymal Stromal Cells from Umbilical Cord Wharton's Jelly with Polyethylenimine. Pharmaceutics. 2020;12(9).
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 2,629
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 6,426


counter
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب