1Department of Pathobiology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
21- Department of Microbiology, Faculty of Vet. Med. University of Tehran 2- Department of Pathobiology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
چکیده
As a contagious avian pathogen, Mycoplasma gallisepticum (MG) inflicts financial damages on the poultry industry. Isolation of the organism is difficult and time-consuming and thus distant from a routine method. Serological checking frameworks for detecting antibodies against M.gallisepticum are broadly utilized in routine diagnosis. Tylosin is a class of macrolide antibiotics extensively used in veterinary medicine for treating mycoplasmosis and prophylaxis. The study aimed to detect MG by immunoassay tests, culture, and polymerase chain reaction (PCR) methods from commercial poultry farms and investigate tylosin susceptibility in isolates. To check antibodies' presence against MG, 750 blood were collected randomly from 38 broiler breeders farms from 2019 to 2022 from Mazandaran and Golestan provinces, Iran, and Rapid Slide Agglutination (RSA) test was performed. Positive results were analyzed for further investigation by ELISA test. Here, 920 swab samples from 38 non-vaccinated commercial farms were collected for culture, and PCR tests were done for isolates strain. The activities of tylosin were tested in vitro against these isolates by broth microdilution method. The smallest antibiotic concentration that led to color change was regarded as the MIC value. Twenty-four farms (63.1%) were positive in the RSA test, and 21 farms (55.2%) were positive for ELISA. Nine of the farms (23.68%) grew on culture media, and 8 (21.05%) were found based on polymerase chain reaction (PCR) for gallisepticum species. The geometric mean of minimum inhibitory concentration (MIC) for tylosin was 5.75 µg/ml, the MIC50 was four µg/ml, and the MIC90 equaled eight µg/ml. The results showed that commercial farms are infected with MG. MG capacity of disseminating and the probable usage of the RSA test as a rapid and cheap method, it can be argued that ELISA and RSA serological tests can be utilized to find MG in poultry herds, and the positive outputs ought to be affirmed through standard microbiological tests or PCR. Besides, it was revealed that the isolated parts of MG changed their susceptibility to tylosin, which showed the need for routine to optimize treatment dosages and efficiency.
شناسایی و جداسازی مایکوپلاسما گالی سپتیکوم و بررسی میزان حساسیت به تایلوزین در جدایه هایه حاصل از مزارع صنعتی
چکیده [English]
مایکوپلاسما گالی سپتیکوم (MG) به عنوان یک پاتوژن مسری پرندگان، خسارات مالی به صنعت طیور وارد می کند. جداسازی ارگانیسم نسبت به رو ش های معمول دشوار و زمان بر است. بررسی سرولوژیکی برای تشخیص آنتی بادی علیه MG به طور گسترده در تشخیص مورد استفاده قرار میگیرد. تایلوزین از دسته آنتی بیوتیک های خانواده ماکرولید بوده که به طور گسترده در درمان مایکوپلاسموز و پیشگیری استفاده می شود. هدف از این مطالعه شناسایی MG با روشهای ایمونولوژی، کشت و روش واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) از مرغداریهای تجاری ایران و بررسی حساسیت تایلوزین در جدایهها می باشد. برای تشخیص وجود آنتی بادی علیه MG ، در مجموع 750 نمونه خون به طور تصادفی از 38 مزرعه مرغ مادر طی سال های 2019 تا 2022 از استان های مازندران و گلستان در ایران جمع آوری گردید و وجود آنتی بادی علیه MG توسط تست آگلوتیناسیون سریع (RSA) و آزمون الایزا مورد بررسی قرار گرفتند. 920 نمونه سواب از 38 مزرعه مرغ مادر غیر واکسینه برای کشت جمعآوری گردید و آزمایش PCR بر روی جدایهها انجام شد. حساسیت تایلوزین در شرایط آزمایشگاهی به روش میکرودایلوشن آزمایش شده و کمترین غلظت آنتیبیوتیکی که منجر به تغییر رنگ گردید، به عنوان مقدار MIC در نظر گرفته شد. 24 مزرعه (1/63%) در تست RSA و21 مزرعه (2/55%) از نظر الایزا مثبت بودند. 9 مزرعه (68/23 درصد) در کشت و8 مزرعه (05/21 درصد) در PCR برای گونه MG مثبت شدند. میانگین MIC برای تایلوزین 5.75 میکروگرم بر میلی لیترو MIC50 و MIC90نیز 4 و 8 میکروگرم بر میلی لیتر بود. نتایج نشان داد که مزارع تجاری آلوده به MG می باشند. با توجه به قابلیت انتشار MG ، سریع و ارزان بودن تست RSA می توان نتیجه گرفت که تست های سرولوژیکی RSA و ELISA می توانند به عنوان برنامه های نظارتی برای تشخیص MG در گله های طیور مورد استفاده قرار گیرند والبته نتایج مثبت باید توسط تست های میکروبیولوژیکی یا PCR تایید گردد. همچنین این تحقیق نشان میدهد که جدایههای MG حساسیت خود را به تایلوزین تغییر داده و نیاز به کنترل روتین برای بهینهسازی دوزها درمانی و کارایی دارو می باشد.