1Chalous Branch, Islamic Azad University, Chalous, Iran
2Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University
3Department of Pathobiology, Science and Research Branch, Islamic Azad University (IAU), Tehran, Iran.
4Razi Vaccine and Serum Institute, Agriculture Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran.
چکیده
Fascioliasis is a common human-animal disease that is reported in most parts of the world. Fascioliasis is also prevalent in different provinces of Iran. Since it has done no study on the excretory/secretory and somatic immunogenic antigens profiles of adult Fasciola in Iran, therefore, the present study was performed on the Fasciola collected from Mazandaran province. For this purpose, the Fasciola worm was isolated from the liver of infected sheep, then its excretory/secretory and somatic antigens were prepared from adult worms. The protein of the samples was measured by the Lowry method. Then, somatic and secretory excretions were examined by SDS-PAGE and the protein profile of the two substances was determined. To evaluate the immunogenicity, the somatic and secretory excretions antigens of Fasciola were injected into white rabbits and after boosting, the blood serum of the rabbits was collected and then Western blotting was performed on them and the results were evaluated. According to the results of Western blotting, 11 somatic antigen bands with a molecular weight of 149,122, 99,85,75,65,50,46,40,37,30 kDa and 12 protein bands of excretory/secretory antigens with molecular weights of 100,82,75,70,58,55,47,40,38,37,30,25 kDa were observed in adult Fasciola that immunogenic, which appear to have a protective effect or can be used to prepare a diagnostic kit.
پروفایل آنتی ژن های ایمونوژنیک دفعی-ترشحی و سوماتیک فاسیولای بالغ
چکیده [English]
فاسیولوزیس یکی از بیماریهای مشترک انسان و دام محسوب میشود که از اکثر نقاط دنیا گزارش میشود. در استانهای مختلف ایران نیز فاسیولوزیس شیوع دارد. با توجه به اینکه در خصوص ترکیبات پروتئینی و آنتی ژنی کرم بالغ و مواد دفعی ترشحی فاسیولا و ایمنیزائی آن در ایران مطالعهای انجام نشده است، بدین جهت مطالعه بر فاسیولای منطقه چالوس از استان مازندران صورت گرفت. برای این منظور، کرم فاسیولا از کبد گوسفندان آلوده جداسازی شد سپس از مواد دفعی ترشحی فاسیولا و پیکره کرم بالغ هموژن تهیه و به روش لوری، پروتئین نمونهها سنجیده شد. سپس، هموژنها و مواد دفعی ترشحی با آزمایش SDS-PAGE مورد بررسی قرار گرفتند و پروفایل پروتئینی این دو ماده تعیین شد. برای بررسی ایمنزایی، آنتیژنهای سوماتیک کرم بالغ و مواد دفعی ترشحی فاسیولا به خرگوشهای سفید تزریق و پس از بوسترسازی، اقدام به جداسازی سرم خون، خرگوشها نموده و پس از آن آزمایش وسترنبلاتینگ بر روی آنها انجام و نتایج مورد بررسی قرارگرفت. با توجه به نتایج آزمایش وسترنبلاتینگ، 11 باند آنتی ژن سوماتیکی با وزن مولکولی 149، 122، 99، 85، 75، 65، 50، 46، 40، 37، 30 کیلودالتونی و 12 باند پروتئینی آنتیژنهای دفعی ترشحی با وزنهای مولکولی 100، 82، 75، 70، 58، 55، 47، 40، 38، 37، 30، 25 کیلودالتون فاسیولای بالغ فاسیولا ایمونوژن مشاهده شد که به نظر میرسند می توانند اثر حفاظتی داشته و یا از آنها می توان برای تهیه کیت تشخیصی مناسب استفاده کرد.