| تعداد نشریات | 286 |
| تعداد نشریات سازمان | 84 |
| تعداد شماره‌ها | 2,846 |
| تعداد مقالات | 32,300 |
| تعداد مشاهده مقاله | 41,387,052 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 18,562,161 |
القاء کالوس و تراریزش ژنتیکی در ارغوان (Cercis griffithii Boiss.) به‌کمک آگروباکتریوم تومه‌فاشینس | ||
| تحقیقات ژنتیک و اصلاح گیاهان مرتعی و جنگلی ایران | ||
| مقاله 8، دوره 22، شماره 2، اسفند 1393، صفحه 225-240 اصل مقاله (563.58 K) | ||
| نوع مقاله: مقاله علمی - پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ijrfpbgr.2015.12226 | ||
| نویسندگان | ||
| نقی شعبانیان1؛ مونا نصیری2؛ محمد شفیع رحمانی* 3 | ||
| 1دانشیار، دانشکدة منابع طبیعی، دانشگاه کردستان | ||
| 2رشناس‌ارشد، جنگل‌شناسی و اکولوژی جنگل، دانشکدة منابع طبیعی، دانشگاه کردستان | ||
| 3نویسندة مسئول مکاتبات، کارشناس‌ارشد، بیوتکنولوژی گیاهی، آزمایشگاه بیولوژی جنگل، دانشکدة منابع طبیعی، دانشگاه کردستان پست الکترونیک: m.rahmani@uok.ac.ir | ||
| چکیده | ||
| ارغوان (Cercis spp.) به‌دلیل ارزش زیبایی‌شناختی، در جنگل‌داری شهری از اهمیت بالایی برخوردار است، اما برخی صفات نامطلوب استفاده از آن را با محدودیت مواجه کرده‌اند که می‌توان آنها را از طریق مهندسی ژنتیک اصلاح کرد. در این مطالعه، ریزنمونه‌های کوتیلدون و ساقة گیاهچه‌های درون‌شیشه‌ای ارغوان در محیط کشت MS حاوی غلظت‌های مختلفی از تنظیم‌کننده‌های رشد به‌منظور القاء کالوس کشت شدند. سویه‌های EHA105 و AGL1 آگروباکتریومتومه‌فاشینس با پلاسمید pCAMBIA2301 ناقل ژن‌های nptII و gus، به‌ترتیب عامل ایجاد مقاومت به آنتی‌بیوتیک کانامایسین و تولیدکنندة پروتئین آنزیمی گزارشگر β–گلوکورونیداز، بر پایة دو روش کلرید کلسیم و تریس تراریزش شدند. سپس سلول‌های کالوس و جنین زایگوتی بالغ با تراکم‌های مختلفی از سویه‌های مختلف آگروباکتریومدر دو شرایط خلأ و غیرخلأ تلقیح گردیدند. نتایج نشان داد که افزودن 4/22 و 1/9 میکرومول تو، فور– دی کلروفنوکسی‌استیک اسید (2,4–D) به محیط کشت به‌ترتیب با 92 و 97 درصد، بهترین نتیجه را برای کالوس‌زایی از ریزنمونه‌های کوتیلدون و ساقه به‌دنبال داشت. غلظت بهینة آنتی‌بیوتیک کانامایسین برای انتخاب بافت و سلول‌های تراریخته تعیین شد. همچنین نتایج نشان داد که استفاده از سویة AGL1 با تراکم نوری 8/0 در شرایط خلأ بیشترین درصد تراریختی بدست آمد. سنجش هیستوشیمیایی ژن گزارشگر و تجزیه و تحلیل مولکولی، ادغام ژن انتقالی در ژنوم شاخساره‌های حاصل از رشد جنین و کالوس القاء شده از این شاخساره‌ها را تأیید کرد. سیستم تراریزش آگروباکتریومی که برای اولین بار در این گزارش توصیف شده است می‌تواند مسیری کارآمد را برای تولید درختان C. griffithiiتراریخت با استفاده از جنین زایگوتی به‌عنوان ریزنمونه ارائه دهد. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| کشت درون‌شیشه‌ای؛ آگروباکتریوم تومه‌فاشینس؛ بیان ژن gus؛ کانامایسین | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| Callus induction and Agrobacterium tumefaciens– mediated genetic transformation in redbud (Cercis griffithii Boiss.) | ||
| نویسندگان [English] | ||
| naghi shabaniyan1؛ mouna nasiri2؛ mohammad shafiee rahmani3 | ||
| چکیده [English] | ||
| Redbud (Cercis spp.), has a great importance in urban forestry and landscape architect, due to its ornamental values. But its use is hampered by some unfavorable traits that can be improved by genetic engineering. In vitro grown of cotyledons and stem explants of redbud were cultured on MS basal medium supplemented with different concentrations of growth regulators for callus induction. EHA105 and AGL1 strains of Agrobacterium tumefaciens were transformed with pCAMBIA2301 binary vector, harboring nptII and gus genes conferring kanamycin (Kan) resistance and reporter enzymatic protein of β-glucuronidase activity, respectively, using calcium chloride (CaCl2) and Tris. Calli and zygotic embryo cells were infected with different densities of Agrobacterium strains under vacuum and normal conditions. Addition of 22.4 and 9.1 μM of 2,4-Dicholophenoxy acetic acid (2,4-D) to medium resulted in the highest 92 and 97% callus induction in cotyledon and stem explants, respectively. Optimum concentration of Kan for selecting of transformed shoot and callus was also detected. The results showed that the highest transformation level can be obtained by OD600 = 0.8 of AGL1 strain in vacuum condition. Histochemical analysis of reporter gene, and polymerase chain reaction (PCR) analysis confirmed transfering of the transgene from agrobacterium to embryo-derived plantlets and callus induced from regenerated shoots. The Agrobacterium tumefaciens-transformation procedure described here for the first time may pave an efficient way for generating transgenic C. griffithii trees using zygotic embryos as explants. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| In vitro culture, Agrobacterium tumefaciens, gus expression, kanamycin | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,625 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 807 |
||