- همه نشریات
- علوم آب و خاک
- علوم اقتصاد و ترویج کشاورزی
- علوم جنگل, مرتع و آبخیزداری
- علوم دامی و شیلات
- علوم زراعی و باغی
- علوم گیاهپزشکی
- علوم مهندسی و مکانیزاسیون کشاورزی
- مجلات ترویجی کشاورزی
- نشریات انجمن ها
- نشریات با زبان انگلیسی
- نشریات با زبان فارسی
- نشریات دانشگاه آزاد اسلامی
- نشریات علمی
- نشریات علمی سازمان تحقیقات، آموزش و ترویچ کشاورزی
آمار
| تعداد نشریات | 277 |
| تعداد نشریات سازمان | 76 |
| تعداد شماره‌ها | 1,978 |
| تعداد مقالات | 22,710 |
| تعداد مشاهده مقاله | 12,165,264 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 9,841,682 |
Evaluation and comparison of Clostridium epsilon-alpha fusion gene expression using different commercial expression vectors | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 17 اردیبهشت 1399 اصل مقاله (1 MB) | ||
| نوع مقاله: Original Articles | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2019.126604.1349 | ||
| نویسندگان | ||
H. R. Sepehrifar1؛ R. Pilehchian Langroudi   2؛ S. Ataei 3؛ A. Haddadi 1
| ||
| 1Department of Microbiology, Karaj Branch, Islamic Azad University, Karaj, Iran | ||
| 2Clostridia Specialized Research Laboratory, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| 3Department of Avian Bacterial Diseases, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| چکیده | ||
| Clostridium perfringens and Clostridium septicum are gram positive, anaerobic, spore forming rods and are pathogen for human and livestock, which are widespread in nature, human and animal digestive system. C. perfringens produce numerous different exoproteins, which are various systems of action. The major C. perfringens toxins include alpha, beta, epsilon and iota. C. perfringens are classified into five groups (A-E) on the basis of the production of these lethal toxins; also toxins secreted from C. septicum include alpha, beta, delta and gamma. Epsilon and alpha toxins of C. perfringens and C. septicum are major causes of enterotoxemia and braxy respectively, in sheep and goat. The production of recombinant immunogenic proteins of these bacteria using suitable expression vectors and expression prokaryotic hosts can be convenient method to reduce the costs, and time of production of clostridial anaerobic vaccines. In the present study, we used recombinant E. coli strain TOP10 containing pJETεα for evaluation C. perfringens type D and C. septicum epsilon-alpha fusion protein into different commercial vectors. After extraction of pJETεα from recombinant cell it was digested by NdeI and XhoI restriction enzymes and was subcloned into pET22b (+), pET26b (+) and pGEM-B1 expression vectors in E. coli/Rosetta and E. coli/BL21 (DE3). The expression of recombinant fusion toxin was evaluated by SDS-page and western blotting in three different temperatures, various IPTG gradients and different times with using pGEMεα, pET22εα and pET26εα vectors in E. coli/Rosetta and E. coli/BL21 (DE3). According of the results, recombinant E. coli/ Rosetta/pET22εα at 37◦C and 6h after from induction by IPTG showed most expression. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| C. perfringens؛ C. septicum؛ epsilon-alpha؛ fusion protein؛ expression | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| ارزیابی و مقایسه بیان فیوژن ژن اپسیلون آلفای کلستریدیومی با استفاده از وکتورهای بیانی تجاری | ||
| چکیده [English] | ||
| کلستریدیوم پرفرینجنز و کلستریدیوم سپتیکوم باکتری های میله ای شکل گرم مثبت، بی هوازی و تولید کننده هاگ و برای انسان و دام بیماری زا بوده و به طور وسیعی در طبیعت و دستگاه گوارشی انسان و حیوان پراکنده اند. کلستریدیوم پرفرینجنز اگزوپروتئین های متعدد مختلفی تولید می کند که دارای سیستم های عملکردی مختلفی هستند. توکسین های اصلی کلستریدیوم پرفرینجنز شامل آلفا، بتا، اپسیلون و یوتا است که بر اساس تولید این توکسین های کشنده به پنج گروه A-E تقسیم می شوند. همچنین توکسین های ترشح شده از کلستریدیوم سپتیکوم شامل توکسین های آلفا، بتا، دلتا و گاما هستند. توکسین اپسیلون کلستریدیوم پرفرینجنز و توکسین آلفای کلستریدیوم سپتیکوم به ترتیب عامل اصلی بیماری انتروتوکسمی و براکسی در گوسفند و بز محسوب می شوند. تولید پروتئین های ایمونوژنیک نوترکیب این باکتری ها با استفاده از وکتورهای بیانی و میزبان های پروکاریوتیک بیانی می تواند روشی مناسب برای کاهش هزینه ها و زمان تولید واکسن های کلستریدیایی بی هوازی باشد. در این مطالعه از باکتری نوترکیب E. coli سویه TOP10 حامل پلاسمید نوترکیب pJETεα برای ارزیابی بیان فیوژن پروتئین اپسیلون-آلفای کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ D و کلستریدیوم سپتیکوم در وکتورهای تجاری استفاده شد. وکتورpJETεα ازسلول های نوترکیب استخراج و توسط آنزیم های محدودالاثر NdeI و XhoI برش داده شد و در وکتورهای بیانی pET22b(+)،pET26b(+) و pGEM-B1 درE. Coli/Rosetta و E. Coli/BL21(DE3) ساب کلون گردید. بیان فیوژن توکسین نوترکیب در سه دمای مختلف، غلظت های مختلف IPTG و زمان های مختلف با استفاده از وکتور های نوترکیب pET22εα، pET26εα و pGEMεα در E. coli/Rosetta و E. coli/BL21(DE3) به روش SDS-page و western blotting ارزیابی گردید. بر اساس نتایج بدست آمده باکتری نوترکیب E. coli/Rosetta/pET22εα در37 درجه سانتیگراد و شش ساعت بعد از القا توسط IPTG بیشترین میزان بیان را نشان داد. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| کلستریدیوم پرفرینجنز, کلستریدیوم سپتیکوم, اپسیلون-آلفا, فیوژن پروتئین, بیان | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 35 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 25 |
||
