- همه نشریات
- علوم آب و خاک
- علوم اقتصاد و ترویج کشاورزی
- علوم جنگل, مرتع و آبخیزداری
- علوم دامی و شیلات
- علوم زراعی و باغی
- علوم گیاهپزشکی
- علوم مهندسی و مکانیزاسیون کشاورزی
- مجلات ترویجی کشاورزی
- نشریات انجمن ها
- نشریات با زبان انگلیسی
- نشریات با زبان فارسی
- نشریات دانشگاه آزاد اسلامی
- نشریات علمی
- نشریات علمی سازمان تحقیقات، آموزش و ترویچ کشاورزی
آمار
| تعداد نشریات | 275 |
| تعداد نشریات سازمان | 74 |
| تعداد شماره‌ها | 1,717 |
| تعداد مقالات | 20,075 |
| تعداد مشاهده مقاله | 10,919,878 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 8,551,628 |
Cloning and Expression of Com1 and OmpH Genes of Coxiella burnetii in Periplasmic Compartment of Escherichia coli with Purpose of Recombinant Subunit Vaccine Production | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 14 مهر 1398 | ||
| نوع مقاله: Original Articles | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2018.122911.1233 | ||
| نویسندگان | ||
Hanieh Bakhteyari1؛ Rana Jahangiri1؛ Narges Nazifi2؛ Ali Kakanezhadifard1؛ Zahra Soleimani1؛ Ali Forouharmehr3؛ Shiva Azadi Chegeni1؛ Amin Jaydary  1
| ||
| 1Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Lorestan University, Khorramabad, Iran. | ||
| 2Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran. | ||
| 3Department of animal science, Faculty of agriculture, Lorestan university, Khorramabad, Iran | ||
| چکیده | ||
| Coxiella burnetii is a obligate and gram negative bacteria causing Q fever disease, despite, importance of Q fever, there is no universal vaccine against this disease. Therefore, applying recombinant subunit vaccines which use Com1 and OmpH as immunogenic proteins can be useful. To perform this project, first genes of Com1 and OmpH were amplified by PCR, then, PCR products were purified by DNA precipitation technique. In order to clone, first, both genes along with pET-22b (+) vector were digested by NcoI and XhoI enzymes and then, Com1 and OmpH were ligated in linear vectors by T4 DNA ligase. Recombinant vectors were transformed in BL21 (DE3) strain of Escherichia coli and expression was induced by 1mM Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside. Expression of Com1 and OmpH was investigated on 12% Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, finally, both proteins were purified by Ni-NTA columns and then confirmed by western blotting. Assessment of results on 1% agarose gel shown, PCR amplification, DNA precipitation and digestion of both genes were successfully done. Results of colony PCRs and sequencing revealed that Com1 and OmpH were correctly cloned in pET-22b(+). Finally, the results of expression, purification and western blotting of both proteins shown, BL21 (DE3) strain of Escherichia coli could be able to express Com1 and OmpH proteins. In view of results, it seems, Escherichia coli as affordable and simple host can be applied to express Com1 and OmpH genes. It should be mentioned, products of this project can be examined as recombinant subunit vaccines against Q fever. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Coxiella burnetii؛ Com1؛ OmpH؛ E.coli؛ subunit vaccine | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| همسانه سازی و بیان ژنهای Com1 و OmpH از باکتری کوکسیلا بورنتی در فصای پری پلاسمیک اشرشیا کلی با هدف تولید واکسن زیرواحدی | ||
| چکیده [English] | ||
| کوکسیلا بورنتی یک باکتری گرم منفی است که سبب بروز بیماری تب کیو میگردد. علی رغم اهمیت بیماری تب کیو، واکنس جهانی برای مقابله با این بیماری وجود ندارد. بنابراین بکارگیری واکسن‌های زیرواحدی که از پروتئین‌های ایمنوژنیک Com1 و OmpH استفاده می‌کنند می‌تواند سودمند باشد. برای انجام این پژوهش ژنهای Com1 و OmpH با استفاده از PCR تکثیر شد، سپس محصولات PCR با استفاده از تکنیک نشست DNA خالصسازی گردید. به منظور همسانه سازی، در ابتدا هر دو ژن به همراه وکتور pET-22b(+) با استفاده از دو آنزیم NcoI و XhoI هضم گردیدند و سپس دو ژن Com1 و OmpH با استفاده از آنزیم T4 لیگاز درون وکتور خطی الحاق گردیدند. وکتورهای نوترکیب به سویه BL21(DE3) از باکتری اشرشیا کلی ترنسفرم گریدند و بیان با استفاده 1 میلی مولار IPTG القاء گردید. بیان Com1 و OmpH با استفاده از SDS-PAGE 12 درصد مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت هر دو پروتئین با استفاده از ستون‌های Ni-NTA خالسازی شدند و با وسترن بلات مورد تایید قرار گرفتند. بررسی نتایج بر روی ژل اگاروز یک درصد نشان داد، تکثیر، نشست DNA و هضم آنزیمی به موفقیت صورت گرفته است. نتایج کلونی PCR و توالی یابی نیز نشان داد که هر دو ژن به درستی درون وکتور الحاق شده اند. نتایح بیان، خالصسازی و وسترن بلات نیز نشان داد سویه BL21(DE3) از اشرشیا کلی تواند است سبب بیان هر دو پروتئین گردد. با توجه به نتایج این تحقیق به نظر می رسد، اشرشیا کلی به عنوان یک سیستم بیانی ساده و ارزان قیمت می تواند برای بیان ژنهای Com1 و OmpH به کار گرفته شود. باید خاطر نشان کرد، محصولات این تحقیق می‌تواند به عنوان واکسن‌های زیرواحدی در مقابل تب کیو مورد آزمایش قرار گیرد. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| کوکسیلا بورنتی, Com1, OmpH, اشرشیا کلی, واکسن زیرواحدی | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 20 |
||
