به منظور ارایه شیوه رویان زایی سوماتیکی جهت انجام فرآینده های دست ورزی ژنتیکی، در مورد صنوبر دلتوئیدس (Populus deltoids Bartr.ex. Marshreastern) ریز نمونه های برگی ایزوله و در محیط کشت MS حاوی هورمونهای رشد 2, 4-D و BA به همراه گلوتامین کشت گردیدند. رویانهای سوماتیکی کروی شکل زیادی به طور مستقیم در امتداد رگبرگهای اصلی و فرعی بوجود آمد. بیشترین تعداد رویانهای سوماتیکی کروی شکل (11.6) در محیط کشت MS حاوی 2 میلیگرم در لیتر 2, 4-D و 0.1 میلیگرم در لیتر BA همراه 40 میکرومول گلوتامین مشاهده شد. محیط کشت MS حاوی 5 میلیگرم در لیتر 2.4-Dو 0.1 میلیگرم در لیتر BA در تمامی تیمارهای گلوتامین موجب تشکیل کالوس تمایز نیافته زیادی در اطراف ریز نمونه ها برگی شد. در محیط کشت باززایی، MS حاوی 2 میلیگرم در لیتر BA همراه 0.1 میلیگرم در لیتر NAA بیشترین درصد باززایی گیاهچه (%72.5) در قطعات کالوس به همراه رویانهای سوماتیکی مشاهده شد. گیاهچه های حاصل پس از ریشه دار شدن در محیط کشت WPM پایه و انجام موفق سازگاری تدریجی در گلدانهای حاوی خاک با نسبت 1:1:1 پیت، پرلیت و ورمیکولایت، به عرصه منتقل شده اند.
Somatic embryogenesis in leaf culture of Populus deltoides Bartr.ex Marshreastern
نویسندگان [English]
A. Jafari-Mofidabadi
Department of Genetics and Plant Physiology, Research Institute of Forests anci
Rangelands, P.O. Box 13185-116, Tehran, Iran
چکیده [English]
In order to develop somatic embryogenesis for genetic manipulation process of Populus deltoides Bartrex Marsh eastern, isolated leaf disk explants were cultured on MS medium supplemented with 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid), BA(benzyladenine) and glutamine. High number of somatic embryos formed on both the midveins and secondary veins. MS medium containing 2 mg/l 2,4-D and 0.1 mg/l BA with 20 J.LM glutamine showed highest number of globular-shaped embryo (11.6). Most of the embryogenic calli were formed on the cut edges of the leaf disks in MS medium containing 5 mg/12,4-D and 0.1 mg/1 BA for all glutamine concentrations. MS plant regeneration media supplemented with 2 mg/l BA and 0.1 mg/1 NAA (Naphtalene Accetic Acid) produced high percentage (72.5%) of plantlets on callused leaf disks explants. Rooted plantlets in WPM basal medium were successfully acclimatized on soil medium (1:1:1 peat, perlit and vermiculite) and transferred to the field.
کلیدواژهها [English]
Leat disk cultute, POPULUS DELTOIDES, Somatic Embryogenesis, Emryognic calli