2هیات علمی دانشگاه آزاد واحد علوم وتحقیقات- ریاست مجتمع آزمایشگاهی دانشگاه آزاد واحد علوم وتحقیقات
3عضو هیات علمی موسسه تحقیقات گیاه پزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران
4هیئت علمی واحد علوم و تحقیقات تهران مدیر کل امور پژوهشی سازمان مرکزی دانشگاه آزاد اسلامی
5هیت علمی دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم وتحقیقات تهران
چکیده
در سالهای اخیر شیوع وسیع بیماری سوختگی و ریزش ناگهانی برگهای درختان شمشاد و متعاقب آن خشکیدگی کامل آنها، با عامل Calonectria pseudonaviculata، سطحی معادل 40000 هکتار از جنگلهای شمال کشور را در معرض نابودی قرار داده است. به منظور بررسی پراکنش این بیماری طی سال 1393، از گیاهان دارای علائم بیماری در مناطق لیرهسر، سیسنگان، چلندر، توسکاتوک، کهنه سرا، نکا شاهبند، سرخکلا، افراچال، سوادکوه، چای باغ، وچات، قائمشهر، آمل، بهشهر در استان مازندران، آستارا، گیسوم، کلات، رودسر، بیجارکنار و سیاهکل در استان گیلان و بندرگز در استان گلستان نمونه برداری شد. ابتدا شناسایی جدایههای قارچی بر اساس ویژگیهای ریختشناسی و پس از آن با استفاده از آغازگر اختصاصی ITS4و ITS311F انجام شد. تنوع بیماریزایی در جمعیت جدایههای این قارچ در گلخانه با تعداد 35 جدایه منتخب همراه شاهد روی نهال شمشاد جنگلی بررسی شد. ویژگیهای ریختشناسی تفکیک کننده این گونه به شرح: کنیدیها واجد یک دیواره عرضی با ابعاد (8/4) 4-6 × (3/47) 68-48 میکرومتر و استیپ (Stipe) بلند به طول 90- 140 میکرومتر، دارای جداره عرضی، و در انتها دارای وزیکل بیضی شکل دارای پاپیل در نوک و در میانه آن دارای بیشترین عرض (10میکرومتر) معرف گونه C. pseudonaviculatum بود. تمامی جدایهها با استفاده از آغازگر اختصاصی و انجام واکنش زنجیرهای پی سی آر باند 250 جفت بازی تولید نمودند. مقایسه میزان شدت بیماری زایی 35 جدایه این قارچ ، آنها را در 15 گروه بیماریزایی متفاوت قرار داد. جدایههای گروههای مختلف بیماریزایی در هر سه استان وجود داشتند.
Distribution, specific detection and the pathogenesis variation of Calonectria pseudonaviculata isolates , causal agent of boxwood blight disease, in Hyrcanian forest of Iran
نویسندگان [English]
P. KHAZAELI1؛ S. REZAEI2؛ M. MIRABOLFATHY3؛ H. R. ZAMANIZADEH4؛ H. KIADALIRI5
چکیده [English]
During recent years outbreak of box blight trees causing sudden leaf abscission have declined about 40000 hectares boxwood trees in Northern forests of Iran. Calonectria pseudonaviculata is the causal agent of the disease. Distribution of boxwood blight disease was monitored in north forests from June to September of 2014. Sampling locations was included the provinces: Mazandaran (Liresar, Sisangan, Chalandar, Toskatook, Kohnesara, Neka, Sorkhkola, Afrachal, Savadkooh, Chaeebagh, Vachat, Ghaemshahr, Amol, Behshahr), Giulan (Astara, Kalat, Gisoom, Roodsar, Siahkal, Bijarkenar) and Golestan (Bandargaz-Livan sharghi) provinces. The isolates were identified based on morphological characteristics at first, then molecular identification confirmed morphological identification using previously designed species-specific primer ITS113F and ITS4. The pathogenesis variation of Hyracanian isolates was tested in green houses using representative 35 isolates. Boxwood blight fungal agent was isolated from all surveyed areas. Morphological criteria distinguishing this species from close Cylindrocladium species including cylindrical, rounded at both ends, 1-septate, 48- 68 (47.3) ×4- 6 (4.8) µm of conidia along with the long stipe (90-14 µm) which was hyaline, extension terminating in a broadly ellipsoid papillated vesicle with the widest part at the middle resulted in to identify all isolates as Cylindocladium pseudonoviculatum. ITS113F and ITS4 primers amplified the expected 250 bp region in all Calonectria pseudonaviculata isolates specifically. Comparing the pathogenicity of 35 isolates on Buxus sempervirens subsp. Hyrcana saplings revealed pathogenicity degree variation among Hyricanian Cylindocladium pseudonoviculatum divided in 15 groups were scattered in three provinces.