1PhD Student in Biotechnology, Institute of Molecular Biology, National Academy of Sciences of Armenia, Yerevan, Armenia
2Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chaamran Uiversity of Ahvaz, Ahvaz, Iran
3Laboratory of Molecular Genetics, Institute of Molecular Biology, National Academy of Sciences of Armenia, Yerevan, Armenia
4Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chaamran Uiversity of Ahvaz, Ahvaz, Iran
چکیده
The venoms of Buthidae scorpions are known to contain basic, single-chain protein -toxins consisting of 60-70 amino acid residues that are tightly cross-linked by four disulfide bridges. Total RNA was extracted from the venom glands of scorpion Mesobuthus eupeus collected from the Khuzestan province of Iran and then cDNA was synthesized with the modified oligo (dT) primer and extracted total RNA as template. By applying the Semi-nested RT-PCR using homologous primers, the fragments of 273 bp was amplified and sequenced. The coding region encodes a polypeptide of 85 amino acid residues with a calculated molecular weight of 9.337 kDa and theoretical isoelectric point of 6.52. It was designated as MeNaTx-4. This peptide with homology to the "Scorpion long chain toxin-like domain" is belongs to the Toxin-3 superfamily. Multiple alignment of the putative amino acid sequence of MeNaTx-4 exhibited 95% sequence identity with lesser Asian scorpion M. eupeus venom sodium channel -toxin-3 but interestingly displayed only 63% identity with other -toxins from this species. The sequence was also identical to the counterpart sequences from M. martensii (92%) and Buthus occitanus israelis (80%). This high sequence similarity together with completely conserved in the positions of all 8 Cys indicated that MeNaTx-4 is a new member of -toxin from the Iranian M. eupeus which may originate from a common ancestor.
شناسایی توالی یک آلفا توکسین جدید مهار کننده کانالهای سدیمی از غده زهر عقرب مزوبوتوس اپئوس ایران
نویسندگان [English]
غفار اسکندری1؛ عباس جلودار2؛ ژانا کتسویان3؛ مسعود رضا صیفیآباد شاپوری4
1دانشجویPhD رشته بیوتکنولوژی، انستیتو بیوتکنولوژی، آکادمی ملی علوم ارمنستان، ایروان، ارمنستان
2گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران
3آزمایشگاه ژنتیک مولکولی، انستیتو بیوتکنولوژی، آکادمی ملی علوم ارمنستان، ایروان، ارمنستان
4گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران
چکیده [English]
زهر عقربهای خانواده بوتیده بعنوان اینکه حاوی پروتئین آلفا تک رشته ای با خاصیت بازی که حاوی حدود 70-60 اسید آمینه است و بوسیله 4 پل دای سولفیدی محکم شده است، شناخته میشود. مجموع کل RNA از غده زهر عقرب مزوبوتوس اپئوس صید شده از استان خوزستان ایران خالص سازی گردید. با استفاده از این RNA بعنوان رونوشت، و پرایمر الیگو (dT) اصلاح شده cDNA ساخته شد. با استفاده از پرایمرهای همولوگ و بکار گیری تکنیک Semi-nested RT-PCR، یک قطعه cDNA با اندازه 273 نوکلئوتید تکثیر شد که متعاقبا تعیین توالی گردید. این قطعه cDNA حاوی ناحیه کد شوندهای بود که آن ناحیه پپتیدی با 85 اسید آمینه را کد مینمود که وزن ملکولی آن 337/9 کیلو دالتون و نقطه ایزو الکتریک آن 52/6 محاسبه گردید. نام این پپتید MeNaTx-4 قرار داده شد. این پپتید با مشابهتی که با دامین مربوط به "توکسینهای عقرب با زنجیره بلند" نشان میداد، جز سوپر فامیلی توکسین-3 قرار گرفت. همترازی اسید آمینه ای MeNaTx-4 نشان داد که این پپتید 95% مشابهت با توکسین آلفا-3 مهار کننده کانالهای سدیمی مربوط به عقرب مزوبوتوس اپئوس آسیایی دارد.