| تعداد نشریات | 286 |
| تعداد نشریات سازمان | 84 |
| تعداد شماره‌ها | 2,846 |
| تعداد مقالات | 32,300 |
| تعداد مشاهده مقاله | 41,386,811 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 18,562,103 |
Semi-quantitative Analysis of Expression of Various Genes in relation to Possible Markers for Theileria annulata Attenuation | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 2، دوره 64، شماره 1، مرداد 2009، صفحه 9-17 اصل مقاله (301.38 K) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2009.103801 | ||
| نویسندگان | ||
| R. Hashemi-Fesharki؛ S. Bozorgi؛ K. Esmaeil Nia؛ G.R. Habibi* ؛ N. Bordbar | ||
| چکیده | ||
| The sporozoites of Theileria annulata invade bovine MHC II cells, where they differentiate into schizonts. The later can immortalize and induce fundamental changes in their host cells. Live attenuated vaccine is an important way of controlling T. annulata infection of cattle. Production is by prolonged cultivation of macroschizont-infected cells. The mechanisms underlying this transformation are not understood. The objects of this work were to analyze the expression levels of MMPs, Pro-inflammatory cytokines, Tams1 and TashHN genes in relation to possible markers for Theileria annulata attenuation. Semi-quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR) was applied to quantify and compare variations in gene expression level among different passage numbers of three cell lines. The results of this study demonstrated that the infected cells show detectable specific transcripts for MMP9 in low passage cultures, but it decreased in long term passages (S15 vaccine strain and high passage number of C1 and C2 cell lines). The analyses of three available cell lines indicated detectable amount of specific mRNAs for TashHN. Tams1 specific transcripts were detected in low passage number of C1 and C2 cell lines, but not obtained in attenuated S15 vaccine and prolonged culture of C1 and C2 cell lines. Two pro-inflammatory cytokines, IL-1-beta and TNF-alpha, were detected with high fluctuations in all three T. annulata infected cell lines, both in low and high passage number. In conclusion, the results of this work clearly showed that the level of MMP9 transcripts is in contrast with the amounts of Tams1 mRNAs in T.annulata schizont infected cell lines that might be considered for virulence and attenuation respectively. Understanding the mechanisms of virulence and attenuation of infected cell line by using molecular biology methods and in vivo animal experiments could help to increase our knowledge about attenuation mechanisms and preparing and identifying appropriate cell lines in order to develop the new T. annulata vaccine cell lines. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Theileria annulata؛ Gene expression؛ Matrix metalloproteinase؛ cell line؛ attenuation؛ vaccine | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| آنالیز نیمه کمی بیان برخی ژن های مرتبط با مارکرهای احتمالی در تخفیف حدت تیلریا آنولاتا | ||
| نویسندگان [English] | ||
| ر. هاشمی فشارکی؛ س. بزرگی؛ کسری اسمعیل نیا؛ ن. بردبار؛ | ||
| چکیده [English] | ||
| تک یاخته تیلریا آنولاتا در داخل سلولهای MHCII میزبان پستاندار از شکل اسپوروزوایت به ماکروشیزونت تبدیل می‌شود و آنگاه سلول را برای متحمل شدن تقسیمات نامحدود تحریک می‌کند. برای پیشگیری از تیلریوز گاوی با کشت مداوم و طولانی مدت سلولهای آلوده به شیزونت تیلریا آنولاتا در محیطهای آزمایشگاهی، واکسن موثری تولید می‌شود که در برخی کشورها منجمله ایران در حال تولید و مصرف می باشد. مکانیسم دقیق تخفیف حدت تک یاخته نامشخص است ولی بنظر می‌رسد کشت مداوم و طولانی مدت سلولهای آلوده به تک یاخته در محیطهای کشت آزمایشگاهی، موجب تغییر در بیان ژنهای سلول میزبان و تک یاخته می‌شود. سلولهای مورد بررسی در این پژوهش شامل سویه واکسن Sa و دو رده سلولی جدیدی است (C1 و C2) که اخیراً در آزمایشگاه تک یاخته شناسی موسسه رازی جدا سازی، شناسائی و تثبیت شدند. یکی از مهمترین تئوری‌ها ارتباط حدت یا ویرولانس تک یاخته با میزان بیان ژن های ماتریکس متالوپروتئیناز MMP در رده‌های سلولی آلوده به تیلریا می‌باشد. در این بررسی با استفاده از تکنیک نیمه کمی RT-PCR به بررسی بیان ژنهای موثر در این پدیده در سطح mRNA پرداخته شد. نتایج بدست آمده از این مطالعه نشان می‌دهد که از میان ژنهای MMP 2، 9 و 13 فقط بیان ژن MMP9 در رده های تخفیف حدت یافتهء سویه واکسن Sa بشدت کاهش داشته و نیز بیان آن در دو رده سلولی C1, C2 در پاساژهای بالای 30-25 نیز افت شدید نشان می‌دهد. در حالیکه در پاساژهای زیر 25 بیان این ژن قابل بررسی از طریق رونوشت‌های mRNA اختصاصی آن بود. فاکتور دیگری که در این بررسی به آن توجه شده نوکلئوپروتئین TashHN است که اخیراً نقش آنرا در ترانسفورماسیون سلولهای میزبان و بیان ژنهای میزبان مطرح می‌کنند و نتایج این مطالعه حاکی از بیان این ژن در سه رده سلولی موجود نشان داد که ارتباط مستقیمی میان بیان این ژن و تکثیر سلولی وجود دارد. در این مطالعه به بررسی بیان ژن های سیتوکینی پیش التهابی (IL-1, TNF-) و Tams1 نیز پرداخته شد. بطوریکه نتایج بررسی سیتوکین‌های پیش التهابی، ارتباط معینی میان بیان ژنهای سیتوکینی و حدت سلول های مورد بررسی نشان نداد. در حالیکه بیان ژن Tams1 در سلولهای با پاساژ پائین با بیان بالای نسخه‌های اختصاصی این ژن همراه بوده ولی در پاساژهای بالا نسخه ای از این ژن قابل ردیابی در هیچکدام از سه رده سلولی مورد بررسی مشاهده نشد. در مجموع نتایج این تحقیق نشانگر نقش ژن های MMP9 و Tams1 در تعیین ویرولانس و تخفیف حدت در لاین های مورد بررسی را بترتیب نشان دادند. آگاهی از مکانیسم های virulence attenuation با متدهای ملکولار بیولوژی در کنار بررسی های in vivoمی‌تواند کمک موثری در بررسیهای دقیق و مستند علمی در تهیه و تولید لاین‌های مناسب تولید واکسن و تعیین ویژگیها و خصوصیات بذر مناسب واکسن کند. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| تیلریا آنولاتا, بیان ژن, ماتریکس متالوپروتئیناز, لاین سلولی, تخفیف حدت و واکسن | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,448 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,133 |
||