| تعداد نشریات | 285 |
| تعداد نشریات سازمان | 83 |
| تعداد شماره‌ها | 3,086 |
| تعداد مقالات | 34,441 |
| تعداد مشاهده مقاله | 48,901,264 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 79,344,453 |
Cloning and sequencing of Toxoplasma gondii major surface antigen (SAG1) gene | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 2، دوره 61، شماره 2، آذر 2006، صفحه 73-79 اصل مقاله (561.05 K) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2006.103786 | ||
| نویسندگان | ||
| A. Dalimi؛ F. Ghafari Far؛ K. Solhjoo* ؛ Z. Sharifi | ||
| چکیده | ||
| Genetic typing methods of T. gondii strains have been extensively perfected in recent years. From a technical point of view, many tools usable for genetic studied on single-copy loci have been used: RFLP, PCR-RFLP, sequencing, RAPD-PCR and isoenzyme analysis. We described the cloning and sequence analysis of the gene which encodes the major surface antigen (SAG1 or P30) of T. gondii. SAG1 is the immunodominant antigen of Toxoplasma gondii tachyzoites being considered as the most promising molecule for a recombinant vaccine or such as DNA vaccine against toxoplasmosis. In the present work, first, genomic DNA of Toxoplasma gondii was extracted and used for amplifying of SAG1 gene as a template. Then PCR product was cloned into pTZ57R/T vector and plasmid containing SAG1 gene (pT-SAG1) was extracted from transformed bacteria and SAG1 gene cloned into pTZ57R/T was sequenced. Results showed that the P30 gene contains no introns and can extract it from genomic DNA of tachyzoite stage. Results showed also that SAG1 gene is cloned in pTZ57R/T plasmid, forming pT-SAG1 recombinant plasmid and E. coli TG1 strain is the best host for pT-SAG1 transformation. Sequence analysis of SAG1 gene cloned into pTZ57R/T vector showed that SAG1 gene sequence from a high virulent strain of T. gondii (Known as RH strain) has 100% sequence identity with P-Br strain, P strain and C strain and high homology of 98% with RH strain and ZS1 strain. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Cloning؛ Sequencing؛ Toxoplasma gondii؛ SAG1؛ P30 | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| کلونینگ و تعیین توالی ژن کد کننده آنتی ژن اصلی سطحی (SAG1) توکسوپلاسما گونده ای | ||
| نویسندگان [English] | ||
| عبدالحسین دلیمی؛ ف. غفاری فر؛ ک. صلحجو؛ ز. شریفی | ||
| چکیده [English] | ||
| در سالهای اخیر روشهای دسته بندی ژنتیکی سویه های توکسوپلاسما گونده ای بطور گسترده ای انجام شده است. از نقطه نظر تکنیکی, روشهای کاربردی زیادی برای مطالعه ژنتیکی روی لوکوسهای تک- کپی (Single-copy) همچونRFLP, PCR-RFLP, تعیین توالی (Sequencing), RAPD-PCR و آنالیز ایزوآنزیمی بکار گرفته شده است. ما در این تحقیق کلونینگ و تعیین توالی ژن کد کننده آنتی ژن اصلی سطحی (P30 یاSAG1) توکسوپلاسما گونده ای را بررسی نمودیم. SAG1آنتی ژن ایمنودومینانت تاکی زوئیت های توکسوپلاسما گونده ای است و به عنوان اصلی ترین مولکول در تهیه واکسن های نوترکیب و واکسن های DNA علیه بیماری توکسوپلاسموزیس می‌باشد. در این تحقیق, ابتدا DNA ژنومی توکسوپلاسما گونده ای استخراج گردید و به عنوان الگو برای PCR ژن SAG1 استفاده شد. سپس محصول PCR درون پلاسمید pTZ57R/T کلون شد و پلاسمید نوترکیب حاوی ژن (pT-SAG1) SAG1 از باکتریهای ترانسفورم شده استخراج و ژن SAG1 کلون شده در پلاسمید PT-SAG1 تعیین توالی شد. نتایج نشان داد که ژن P30 اینترون ندارد و می‌تواند از DNA ژنومی مرحله تاکی زوئیت جدا شود. همچنین نتایج نشان داد که ژن SAG1 در پلاسمید pTZ57R/T کلون شده است و پلاسمید نوترکیب تولید شده است و باکتری E.coli سویهTG1 بهترین میزبان برای ترانسفورماسیون پلاسمید pT-SAG1 جدا شده از سویه با حدت توکسوپلاسما گونده ای(معروف بهRH), شباهت صد در صدی با سویه P-Br, سویهP و سویه C دارد و با سویه RH و سویه ZS1 شباهت 98 درصدی دارد. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| کلونینگ, تعیین توالی, توکسوپلاسما گونده ای, SAG1, P30 | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,527 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 3,095 |
||