| تعداد نشریات | 286 |
| تعداد نشریات سازمان | 84 |
| تعداد شماره‌ها | 2,980 |
| تعداد مقالات | 33,446 |
| تعداد مشاهده مقاله | 43,911,682 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 20,410,721 |
Detection of Ornithobilharzia turkestanikum cercaria (trematoda) by nested-PCR in intermediate host snail, Lymnaea gedrosiana | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 5، دوره 63، شماره 2، مهر 2008، صفحه 35-40 اصل مقاله (311.16 K) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2008.103741 | ||
| نویسندگان | ||
| N. Motamedi؛ R. Salehi Tabar؛ A.H. Dalimi؛ H. Paykari؛ S.A. Ghorashi؛ Gh.R Motamedi* ؛ Gh.R. Karimi | ||
| چکیده | ||
| Trematodes are important in economic and public health. Ornithobilharzia turkestanicum (O. turkestanicum) is one of the important economic trematodes in domestic animals. Ornithobilharzia infection in intermediate host (Lymnaea gedrosiana ) can be detected by either exposing snails to light to induce cercarial shedding or by squeezing them between glass slides to detect parasites. The current available diagnostic methods are inefficient for identification of prepatent infections and/or after dead of snails. For the above difficulties we adapted a nested polymerase chain reaction (Nested-PCR) assay for sensitive detection of O. turkestanicum in clinical samples and its cercaria in snails. The life cycle of parasite was maintained in sheep and snails in laboratory in Razi Institute. Adult worms were isolated from sheep and DNA was extracted from worms by a procedure using DNA extraction solution developed in NIGEB. PCR and nested-PCR primers were designed based on 28s ribosomal RNA gene of O. turkestanicum and the DNA was amplified by PCR assay. PCR product was purified and cloned in pTZ57R/T and sequenced. The comparison of the obtained sequences with the GenBank using blast program was sh owed in NCBI Sequence viewer just 682 bp. PCR amplicon was submitted in GenBank and can be assessed using AY862391 accession number. DNA was extracted from the infected and non-infected snails 2-5 days post-infection. The infected snails could be rapidly detected with Nested-PCR. Results indicate that this assay is specific for detecting O. turkestanicum. The high sensitivity of the test enabled identification of single infected snail even when its DNA was pooled with uninfected snails. Thus demonstrating the possibility of mass diagnosis in pools of snails, therefore, the assay has the potential for large-scale demonstration of prepatent infection prevalence in snails and offers a new diagnostic tool for evaluation of bilharziosis trasnsmission and for control of infection as discussed. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| PCR؛ Nested؛ Diagnosis؛ Trematoda؛ Ornithobilharzia turkestanicum | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| شناسایی سرکر اورنیتوبیلارزیا ترکستانیکم ) ترماتودا) در حلزون لیمنه آ گدروزیانا بوسیله Nested-PCR | ||
| نویسندگان [English] | ||
| ن. معتمدی؛ ر. صالحی تبار؛ عبدالحسین دلیمی؛ حبیب اله پایکاری؛ سیدعلی قریشی؛ غلامرضا معتمدی؛ غلامرضا کریمی | ||
| چکیده [English] | ||
| ترماتودهای خانواده شیستوزوماتیده در عروق خونی انسان وحیوانات زندگی می کنند. انگل ارنیتوبیلارزیا ترکستانیکم یکی از کرمهای خانواده شیستوزوماتیده است که برخی ازحیوانات پستاندار را آلوده می کند. با توجه به اینکه اولاً محل زندگی میزبانهای واسط گونه های مختلف شیستوزوما در آب های شیرین است و ثانیاً از لحاظ شکل ظاهری, سرکر آنها شبیه یکدیگر می باشند، روشهای تشخیصی مطمئن برای شناسایی و تفریق آنها از یکدیگر مورد نیاز می باشد. در این مطالعه یک روش PCR برای تشخیص انگل در حیوانات آلوده تهیه گردیده است. پرایمرهای اختصاصی بر مبنای سکانس منتشر شده این کرم طراحی شده است. ابتدا DNA انگل استخراج و سپس آزمایش PCR بهینه سازی گردید و قطعه ای به طول 724 جفت باز از کرم بالغ تکثیر شد. محصول PCR ابتدا در وکتور pTZ57R/T کلون و سپس تعیین توالی گردید و بدین ترتیب اختصاصی بودن آزمایش مورد تأئید قرار گرفت. از تمام بافت های حلزون برای استخراج DNA انگل نیز استفاده شد . برای این منظور از روش Nested –PCR بکمک یک جفت پرایمر استفاده گردید . در این آزمایش قطعه ای بطول 449 جفت باز تکثیر شد و وجود یک حلزون آلوده در مجموعه ای از حلزون های غیرآلوده تشخیص داده شد. توالی به دست آمده به کمک برنامه بلاست نشان داد که این توالی دارای 682 جفت باز در محصول PCR میباشد. این اطلاعات با شماره AY862391 در بانک ژن قابل دسترسی است. نتایج این مطالعه نشان داد که در کنار سایر روشهای آزمایشگاهی می توان از PCR و Nested -PCR به عنوان روش های تشخیصی مناسب جهت شناسایی سرکر ارنیتوبیلارزیا ترکستانیکم در نمونه های کلینیکی بهره جست. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| PCR, Nested, تشخیص, ترماتود, اورنیتوبیلارزیا ترکستانیکم | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 14,914 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,379 |
||