| تعداد نشریات | 286 |
| تعداد نشریات سازمان | 84 |
| تعداد شماره‌ها | 2,846 |
| تعداد مقالات | 32,300 |
| تعداد مشاهده مقاله | 41,386,929 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 18,562,131 |
Cloning rhoptry protein 1 (ROP1) gene of Toxoplasma gondii (RH) in expression vector | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 2، دوره 63، شماره 2، مهر 2008، صفحه 11-17 اصل مقاله (350.34 K) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2008.103738 | ||
| نویسندگان | ||
| F. Ghaffarifar؛ A. Dalimi؛ Z. Eslamirad* ؛ Z. Sharifi | ||
| چکیده | ||
| Toxoplasma gondii contain various immunogenic antigens. The most important Toxoplasma antigens are somatic and excreted/secreted antigens. Rhoptry proteins are known as excreted/secreted antigens. These antigens have been proposed as a vaccine candidate against toxoplasmosis. The main objective of the present work was cloning rhoptry protein1 (ROP1) Gene of Toxoplasma gondii (RH) in a cloning vector for gene analysis and further production of rhoptry proteins. Tachyzoites of the RH strain of T. gondii were harvested from the peritoneal fluid of mice that has been experimentally infected with the parasites. Genomic DNA was extracted by phenol- chloroform method. The ROP1 fragment amplified with specific primers. The purified PCR products were ligated between the EcoR1 and BamH1 sites of the pTZ57R/T cloning vector and transformed into Escherichia coli TG1 strain and screened by IPTG and X-Gal. The plasmid was purified and visualized under UV transilluminator. The amplified fragment was cloned in pTZ57R vector successfully. The correct orientation of the ROP1 fragment was identified by restriction enzyme analysis and sequencing of constructed plasmid. A fragment about 760bp was separated from PTZ57R following digestion and demonstrated on agarose gel electrophoresis.The sequence of this amplified gene showed homology up to 96% with target gene in GenBank database (Accession no. M71274). Recombinant plasmid of ROP1 gene was constructed. It is ready for future study. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Toxoplasma gondii؛ Cloning؛ Rhoptry Protein1 (ROP1) Gene | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| کلونینگ ژن ROP1 توکسو پلاسما گوندی (RH) در وکتور بیانی | ||
| نویسندگان [English] | ||
| ف. غفاری فر؛ عبدالحسین دلمیم؛ ز. اسلامی راد؛ ز. شریفی | ||
| چکیده [English] | ||
| توکسو پلاسما گوندی دارای آنتی ژنهای ایمنوژنیک متعددی است. مهمترین آنتی ژنهای توکسو پلاسما آنتی ژنهای سوماتیک و دفعی- ترشحی می باشند. پروتیئن های راپتری به عنوان آنتی ژن دفعی- ترشحی شناخته می شوند. این آنتی ژنها برای ساخت واکسن بر علیه توکسو پلاسموزیس کاندیدا هستند. هدف اصلی این مطالعه کلون کردن ژنROP1 توکسو پلاسما گوندی (RH) در وکتور کلونینگ مناسب به منظور آنالیز ژن و استفاده از آن برای مطالعات بعدی تولید پروتئین بود. تاکی زوئیت های سویه RH توکسو پلاسما گوندی از مایع صفاقی موشهای آلوده به انگل جمع آوری شد. DNA ژنومی به روش فنل-کلروفرم استخراج گردید. قطعه 1 ROPبا پرایمرهای اختصاصی تکییر شد. محصول PCR خالص شده بین سایتهای EcoR1 وBamH1 وکتور pTZ57R/T قرار گرفت و در سویه TG1 اشریشیا کلی ترانسفرم گردید و توسطIPTG و X-Gal غربالگری شد. پلاسمید طراحی شده استخراج گردید و بعد از الکتروفورز با اشعه UV مشاهده گردید.قطعه تکثیر شده با موفقیت در وکتور pTZ57R/T کلون شد. صحیح قرار گرفتن قطعه ROP1 در پلاسمید طراحی شده توسط آنزیم های برش دهنده و sequencing بررسی گردید. بعد از برش، قطعه ای حدودbp 760 ازپلاسمید جدا شد که بعد از الکتروفورز بر روی ژل آگاروز مشاهده گردید. توالی ژن تکثیر یافته نشان دهنده هومولوژی بیش از 96% با ژن مورد نظر در GenBank بود. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| توکسو پلاسما گوندی, کلونینگ, ژن راپتری پروتیئن 1 | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 14,371 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,018 |
||