| تعداد نشریات | 286 |
| تعداد نشریات سازمان | 84 |
| تعداد شماره‌ها | 2,846 |
| تعداد مقالات | 32,300 |
| تعداد مشاهده مقاله | 41,387,091 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 18,562,169 |
بررسی میزان آلودگی عسل های تولید شده در زنبورستانهای استان تهران به اسپورهای پنی باسیلوس لاروا لارو ا (عامل بیماری لوک آمریکایی) با روش کشت وPCR | ||
| علوم و فنون زنبور عسل ایران | ||
| مقاله 1، دوره 06، شماره 10، مرداد 1394، صفحه 3-10 اصل مقاله (3.11 M) | ||
| نوع مقاله: علمی- ترویجی | ||
| چکیده | ||
| مجتبی محرمی1– حسین مدیرروستا2 استادیار پژوهشی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی کرج کارشناس بخش تحقیقات زنبور عسل، کرم ابریشم و حیات وحش موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی کرج ٭نویسنده مسئول: mojmoharrami@yahoo.com چکیده مقدمه:بیماری لوک آمریکایی زنبور عسل از بیماریهای بسیار مهم و نابود کننده لاروهای زنبور عسل می باشد. جداسازی پنی باسیلوس لاروا لاروا عامل بیماری لوک امریکایی از نمونه های لارو بیمار یا مشکوک به بیماری مهمترین روش تایید تشخیص محسوب میشود. با توجه به اینکه نمونه گیری از عسل بسیار آسان تر از سایرروشهای نمونه گیری (لارو، موم، ...) می باشد و همچنین مزاحمت کمتری برای کلنی ها وزنبورداران ایجاد می نماید. امروزه استفاده از نمونه های عسل برای تایید تشخیص بالینی و ردیابی آلودگی در زنبورستانها بسیار رایج گردیده است. هدف از این مطالعه تعیین میزان شیوع آلودگی به پنی باسیلوس لاروا لاروا در زنبورستانهای استان تهران از طریقکشت و جدا سازی باکتری ازنمونه های عسل و PCR ان برای تشخیص نهاییباکتری پنی باسیلوس لاروا لاروا به جای تستهای بیوشیمیایی که بسیار زمان بر و پر هزینه بوده و گاهی با نتایج گمراه کننده همراه هستند، می باشد. روش کار:تعداد 121 نمونه عسل از زنبورداری های سطح استان تهران (قدیم) به صورت تصادفی انتخاب و نمونه برداری گردید. نمونه ها کشت شده و باروش PCRمورد آزمایش قرار گرفتندو محصول PCR روی ژل آگارز 8/0 درصد الکتروفورز شد. نتایج: از121 نمونه عسلجمع آوری شده اززنبورستانهای استان تهران، از31 نمونه عسلپنی باسیلوس لاروا لارواجدا سازی وبا روش PCRتایید نهایی گردید. بنا بر اینمیزان شیوع آلودگی در زنبورستانهای استان تهران6/25 % می باشد. با توجه به امکان الودگی فراورده های زنبور عسل به این اسپورها و حساسیت ان در تجارت جهانی و تاثیر کاملا منفی ان بر روی صادرات، مونیتورینگ و شناسایی این اسپورها در عسلها بسیار ضروری می باشد. | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| Survey of contamination rate of Paenibacillus larvae larvaeSpores(the causative agent of American foulbrood)In the produced honey in apiaries of Tehran province by culture and PCR | ||
| چکیده [English] | ||
| Mojtaba Moharami 1 - Hossein Modirrousta 2 1-Assistant Professor of Bee Pathology, Razi vaccine and Serum Research Institute. 2- MSc of Microbiology, Razi vaccine and Serum Research Institute Abstract American foulbrood (AFB), a severe bacterial disease of honeybee brood, caused by the sporeforming bacterium Paenibacillus larvae subspecies larvae. The agent, infect and kill larvae and produce billions of resistantspores to environmental factors.The spores are distributed in bee colonies and apiaries, thus bee products (honey…) are contaminated. For diagnosis, culture and chemical tests are very timeconsuming and expensive which occasionally give false result. In this study, 121 samples of honey were collected from apiaries in Tehranprovince. The samples wereselected by simple random method. Honey samples were diluted with an equal volume of distilled water and centrifuged, then the pellet used for DNA extraction. DNA was used for culture and PCR. PCR products were electrophoresed on 0.8%agarose gel. The result showed that out of 121 honey samples which collected from beekeeping of Tehran province, 31(25/6 %) samples were positive by culture andPCR. To control and preventive measures before the occurrence of any kind of damages, we can monitor orscreen of honey samples on regional and national scale by using culture and PCR method. According to the possibility of Honey contamination with the spores and its importance in global trade and a clear negative impact on exports, monitoring and detection of spores in honeys is very essential. | ||
| مراجع | ||
|
منابع: 1.Alessandro B.D. , Antunez K. , Piccini C. , Zunino P. (2007) DNA extraction and PCRdetection of Paenibacillus larvae spores from naturally contaminated honey and bees using spore- decoating and freeze-thawing techniques.World J Microbiol Biotechnol 23:593–597
2.Alippi A.M., Lopez A.C. & Aguilar O.M. (2004).A PCR-based method that permits specific detection of Paenibacillus larvae subsp. larvae, the cause of American Foulbrood of honey bees, at the subspecies level. Applied Microbiology, 39 : 25–33
3.Alippi A.M., Lopez A.C. & Aguilar O.M. (2002). Differentiation of Paenibacillus larvae subsp.larvae, the cause of American foulbrood of honeybees, by using PCR and restriction fragment analysis of genes encoding 16S rRNA. Appl. Environ. Microbiol., 68 (7): 3655-3660.
4.Antunez K.A., Alessandro B.D., Piccini C., Corbella E. & Zunino P. (2004).Paenibacillus larvae larvae spores in honey samples from Uruguay: a nationwide survey , Journal of Invertebrate Pathology, 86 : 56–58
5. Bakonyi T., Derakhshifar I, Grabensteiner E., Nowotny N. (2003). Development and evaluation of PCR assays for the detection of Paenibacillus larvae in honey samples: comparison with isolation and biochemical characterization. Appl. Eviron. Microbiol., 69 (3):1504-1510.
9. Davidson, E.W. (1973). Ultrastructure of AFB disease pathogenesis in larvae of the worker bee, Apis mellifera. J. lnvertebr. Pathol.. 21 : 53-61.
10. Heyndrickx, M., Vandemeulebroecke, K., Hoste, B., Janssen, P., Kersters, K., De Vos, P., Logan, N. A., Ali, N. & Berkeley, R. (1996).Reclassification of Paenibacillus (formerly Bacillus) pulvifaciens (Nakamura 1984) Ash et al. 1994, a later subjective synonym of Paenibacillus (formerly Bacillus) larvae (White 1906) Ash et al. 1994, as a subspecies of P. larvae, with emended descriptions of P. larvae as P. larvae subsp. larvae and P. larvae subsp. pulvifaciens. Int J Syst Bacteriol 46 : 270–279.
11. Govan, V. A., M. H. Allsopp, and S. Davison. (1999). A PCR detection methodfor rapid identification of Paenibacillus larvae. Appl. Environ. Microbiol.65:2243– 2245
12. Graff de Dirk C.,Vandekerchove D., Dobbellaere W., Peeters J.E.,Jacobs F.J. (2001). Influence of the proximity of American Foulbrood cases and apicultural management on the prevalence of Paenibacillus larvae spores in Belgian honey.Apidologie 32: 587-599.
13.Gregorc, A., Bowen, I.D., (1998). Histopathological and histochemical changes in honeybee larvae (Apis mellifera L.) after infection with Bacillus larvae, the causative agent of American foulbrood disease. Cell Biol. Int. 22:137– 144.
14.Krystyana P., Andrezej B. (2008). Occurrence of Paenibacillus larvae spores in honey samples domestic apiaries.J. apicultural science.52 (2):105-111
15. Lipinski Z., Szubtarski J., Szubtarska D., Kasztelewicz J. (2007).The contamination of winter stores and early spring honey with spores of Paenibacilluslarvae in Polish apiaries of the Malopolska – provice. Polish J.Vet.Sci. 10(2): 71-74
16. Modirrousta H., Moharrami M., Torkaman M.(2012). Development of PCR method for diagnosing of honey bee American Foulbrood disease. Archives of Razi Institute,Vol. 67, No.1:1-5
17.Neuendorf S. Hedtke K, Tangen G. and Genersch E. (2004).Biochemical characterization of different genotypes of Paenibacillus larvae subsp. larvae, a honey bee bacterial pathogen. Microbiology, 150: 2381–2390
18. OIE Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (2010).
Part 2 , Section 2.2 , Chapter 2.2.2
19. Pernal S.F., Melathopoulos a.p. (2006).Monitoring for American Foulbroodspores from honey and bee samples in canada.Apiacta. 41: 99-109.
20. Piccini C., D'Alessandro B., Antunez K. & Zunino P. (2002). Detection of Paenibacillus larvae subsp. Larvae spores in naturally infected bee larvae and artificially contaminated honey by PCR.World J. Microbiol. Biotechnol., 18 : 761- 765.
21. Ritter W. (2003). Early detection of American foulbrood by honey and wax analysis.
Apiacta, 38: 125–130.
22. Schuch .M.T., Madden R.H. & Sattler A. (2001). An improved method for thedetection and presumptive identification of Paenibacillus larvae subsp. larvae spores
in honey. J. Apicult. Res., 40(2): 59–64.
23. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. (1989) Molecular cloning: a laboratorymanual, 2nd edn. ColdSpringHarbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY
24. Von der ohe W. & Dustmann J.H. (1997). Efficient prophylactic measures against American foulbrood bybacteriological analysis of honey for spore contamination.Am.Bee J., 137(8): 603–606.
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,212 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 850 |
||