1نویسنده مسئول مکاتبات، کارشناس ارشد، جنگلشناسی و اکولوژی جنگل، دانشکده علوم جنگل، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی، گرگان، پست الکترونیک: nastaranmehrirad91@yahoo.com
2استادیار، دانشکده علوم جنگل، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی، گرگان
3دانشجوی دکترا، دانشکده علوم جنگل، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی، گرگان
چکیده
گیاهان بهعلت داشتن متابولیتهای ثانویه، اهمیت جهانی و کاربرد وسیعی در زمینههای گوناگون دارند. جنستوس (Betula) حاوی متابولیتهای ثانویه بهویژه ترپنها است که خاصیت پیشگیریکننده سرطان پوست و درمانکنندگی بیماریHIV، هپاتیت و مالاریا را دارد. یافتن جایگزین مناسب برای داروهای مصنوعی با گیاهان دارویی با توجه به محدود بودن تعداد پایهها و در معرض خطر انقراض قرار گرفتن گونههای گیاهی مورد نظر امری ضروریست. با مدنظر قراردادن مشکلات مربوط به تکثیر و تولید گیاهان دارویی، زراعی و جنگلی، از روشهای دیگری نظیر کشتهای درون شیشهای با اعمال محرکهای تولیدی، برای بهدست آوردن این مواد مؤثره گیاهی میتوان استفاده کرد. هدف از انجام پژوهش حاضر، ارزیابی تأثیر تیمار نور و تاریکی بر میزان تولید ماده مؤثره بتولین در کالوسهای القا شده چهار ماهه پس از کشت ریزنمونههای برگ گونهB. litwinowii در شرایط درون شیشهای بود. ریزنمونهها از برگهای جوان پایههای مادری بالغ (بالای 25 سال) و نهالهای پنج ساله از رویشگاه سنگده فریم در فصل تابستان تهیه و در محیط کشت WPM در شرایط نور و تاریکی کشت داده شدند. بهمنظور تجزیه و تحلیل کالوسزایی از آزمون t مستقل غیرجفتی با پنج تکرار و برای تجزیه میزان بتولین، از منحنی کالیبراسیون حاصل از تزریق محلول استاندارد با استفاده از دستگاه HPLC استفاده شد. نتایج نشان داد شرایط نوری 16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی با نور سفید و شدت 1000 تا 1500 لوکس برای کالوسدهی ریزنمونهها بسیار ضروری بوده و زمانی که ریزنمونه از پایه مادری مسنتر تهیه شد، میزان بتولین القاء شده بیشتری (سه برابر) حاصل شد.
عنوان مقاله [English]
Effect of trees age and light on Betula litwinowii callogenesis and betulin
induced in vitro conditions
Plants due to their secondary metabolites have world value and wide applications in various fields of technology. Birch genus (Betula) contains secondary metabolites, especially terpenes which have preventive properties for skin cancer, HIV virus, hepatitis, and malaria. Finding a suitable alternative for pharmaceutical industry is essential due to the limited mother trees and danger of extinction of the mentioned species. Considering the problems associated with crop production and forestry, other methods such as invitro plantation by applying triggers to obtain the herbal ingredients can be used. The purpose of this research was to evaluate the effects of light and dark on Betulin production in four month calli of in vitro produced B. litwinowii. Explants were prepared by leaves of 25 years old mother plants and 5 years old seedlings during summer from Sangdeh site. They were cultured on WPM plantation medium at light and dark conditions. For analysis of callus production a t- independent test with 5 replicates was used, Analysis of Betulin rate was used using a calibration curve that was obtained by injection of standard solutions using HPLC system. Results showed that light conditions (16 hours light and 8 hours dark) with white light intensity of 1000-1500 lux were essential for callogenesis explants and Betulin quantity was higher in explants prepared from older mother plants.
کلیدواژهها [English]
Betula, light conditions, Secondary metabolites, Tissue culture, WPM medium